專技高考-醫事檢驗師微生物學與臨床微生物學（包括細菌與黴菌）110 年第 4 題單選題
下列何種染色法最不常用於分枝桿菌的檢查？
AZiehl-Neelsen stain
BKinyoun stain
CAuramine-Rhodamine stain
DAcridine orange stain正確答案
D正確答案
分枝桿菌因細胞壁富含分枝菌酸需用抗酸染色，Acridine orange 是核酸螢光染色非抗酸染色法，最不常用。
為什麼答案是 D
Acridine orange 是與核酸（DNA/RNA）結合的螢光染色，常用於偵測一般細菌或無法判讀的革蘭氏染色檢體，與抗酸性無關，最不用於分枝桿菌檢查。
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完整詳解
Pro · 無限重點 分枝桿菌因細胞壁富含分枝菌酸需用抗酸染色，Acridine orange 是核酸螢光染色非抗酸染色法，最不常用。
抗酸菌＝抗酸染色（ZN、Kinyoun）或螢光抗酸（Auramine）；Acridine orange 染核酸，與抗酸無關，直接選D。
逐選項分析
A✕
Ziehl-Neelsen stain 是經典的熱染抗酸染色法（hot method），利用石碳酸復紅染分枝菌酸，是檢查分枝桿菌最常用的標準方法。
B✕
Kinyoun stain 是冷染抗酸染色法（cold method），不需加熱，同樣用於檢查抗酸菌（分枝桿菌），臨床常用。
C✕
Auramine-Rhodamine stain 是螢光抗酸染色，靈敏度高、適合大量篩檢，是現代結核菌篩檢常用的染色法，並非最不常用。
D✓ 正確
Acridine orange 是與核酸（DNA/RNA）結合的螢光染色，常用於偵測一般細菌或無法判讀的革蘭氏染色檢體，與抗酸性無關，最不用於分枝桿菌檢查。
分枝桿菌常用染色法比較
| 染色法 | 原理 | 加熱與否 | 用途 |
|---|
| Ziehl-Neelsen | 石碳酸復紅抗酸 | 需加熱(熱染) | 標準抗酸菌染色 |
| Kinyoun | 石碳酸復紅抗酸 | 不加熱(冷染) | 抗酸菌染色 |
| Auramine-Rhodamine | 螢光抗酸 | 不加熱 | 高靈敏篩檢結核菌 |
| Acridine orange | 核酸螢光 | 不加熱 | 一般細菌/檢體偵測(非抗酸) |
四個選項都是『染色法』且三個含螢光或抗酸概念，易誤以為都用於分枝桿菌。關鍵在於 Acridine orange 染的是核酸而非分枝菌酸，與抗酸性無關，是唯一的例外。
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