專技高考-醫事檢驗師微生物學與臨床微生物學（包括細菌與黴菌）104 年第 75 題單選題
下列何種染色法不適合於分枝桿菌的觀察？
AAuramine-Rhodamine Fluorochrome stain
BZiehl-Neelsen Acid-fast stain
CKinyoun stain
DGram stain正確答案
D正確答案
分枝桿菌細胞壁含大量分枝菌酸 (mycolic acid)，革蘭氏染色無法穿透，必須用抗酸性染色法觀察。
為什麼答案是 D
Gram 染色因分枝桿菌細胞壁富含蠟質分枝菌酸，染料無法有效穿透，染色結果不佳（常呈 ghost cell 或弱陽性），故不適合觀察分枝桿菌。
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完整詳解
Pro · 無限重點 分枝桿菌細胞壁含大量分枝菌酸 (mycolic acid)，革蘭氏染色無法穿透，必須用抗酸性染色法觀察。
看到「分枝桿菌」就想「抗酸性染色 (AFB)」，Gram stain 一律出局。
逐選項分析
A✕
Auramine-Rhodamine 螢光染色法是抗酸性染色的螢光版本，常用於結核菌篩檢，敏感度高，可在低倍鏡快速掃描，適合分枝桿菌觀察。
B✕
Ziehl-Neelsen 染色是經典的抗酸性染色法 (AFB)，使用石碳酸復紅加熱染色，分枝桿菌會呈現紅色抗酸桿菌，是診斷結核的標準方法。
C✕
Kinyoun 染色是改良型的冷式抗酸性染色 (cold AFB)，不需加熱，原理與 Ziehl-Neelsen 相同，同樣適合觀察分枝桿菌與部分弱抗酸菌如 Nocardia。
D✓ 正確
Gram 染色因分枝桿菌細胞壁富含蠟質分枝菌酸，染料無法有效穿透，染色結果不佳（常呈 ghost cell 或弱陽性），故不適合觀察分枝桿菌。
分枝桿菌常用染色法整理
| 染色法 | 原理 | 顏色結果 | 適用性 |
|---|
| Ziehl-Neelsen | 熱式抗酸 | 紅色桿菌/藍背景 | ✅ 標準法 |
| Kinyoun | 冷式抗酸 | 紅色桿菌/藍背景 | ✅ 改良法 |
| Auramine-Rhodamine | 螢光抗酸 | 黃綠螢光 | ✅ 篩檢首選 |
| Gram stain | 革蘭氏染色 | 難染/ghost cell | ❌ 不適合 |
本題為反向題「不適合」，要選的是「不能用於分枝桿菌的染色」。粗心者看到 Gram 是最熟悉的染色法可能誤以為通用，但分枝桿菌的蠟質細胞壁正是 Gram 染色的剋星。
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