專技高考-醫事檢驗師生物化學與臨床生化學107 年第 10 題單選題
下列測定蛋白質濃度的方法，何者具有最佳的靈敏度？
A280 nm absorption
BLowry正確答案
Crefractometry
Dturbidimetry
B正確答案
Lowry 法結合雙縮脲反應與 Folin 試劑，靈敏度可達 μg 級，是四者中最敏感的蛋白質定量法。
為什麼答案是 B
Lowry 法先以 Cu²⁺ 與胜肽鍵反應，再加 Folin-Ciocalteu 試劑與 Tyr/Trp 還原顯色，雙重放大訊號，靈敏度可達 1–20 μg/mL，為四者中最敏感。
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完整詳解
Pro · 無限重點 Lowry 法結合雙縮脲反應與 Folin 試劑，靈敏度可達 μg 級，是四者中最敏感的蛋白質定量法。
看到「最靈敏」蛋白質定量 → 直接想 Lowry / BCA / Bradford；280 nm 與比濁/折射只能粗測。
逐選項分析
A✕ 陷阱
280 nm 吸光法利用 Trp、Tyr 的芳香族側鏈吸收，操作快但靈敏度低（mg/mL 級），且易受核酸（260 nm）干擾，不同蛋白吸光係數差異也大。
B✓ 正確
Lowry 法先以 Cu²⁺ 與胜肽鍵反應，再加 Folin-Ciocalteu 試劑與 Tyr/Trp 還原顯色，雙重放大訊號，靈敏度可達 1–20 μg/mL，為四者中最敏感。
C✕
折射法 (refractometry) 測溶液折射率變化，僅適用於高濃度蛋白（如血清總蛋白），靈敏度差，無法測微量樣品。
D✕
比濁法 (turbidimetry) 利用蛋白沉澱後濁度變化定量，受顆粒大小與沉澱條件影響大，靈敏度與精準度皆不如顯色法。
常見蛋白質定量法靈敏度比較
| 方法 | 原理 | 偵測下限 | 備註 |
|---|
| 280 nm UV | Trp/Tyr 吸光 | ~50–100 μg/mL | 快速但易被核酸干擾 |
| Lowry | Biuret + Folin 還原顯色 | 1–20 μg/mL | 靈敏但受還原劑/界面活性劑干擾 |
| Bradford | Coomassie 染料結合 | 1–10 μg/mL | 快速、與 SDS 不相容 |
| BCA | Cu⁺ + BCA 紫色錯合物 | 0.5–10 μg/mL | 最靈敏、耐界面活性劑 |
| Refractometry | 折射率 | mg/mL 級 | 只適合高濃度血清 |
| Turbidimetry | 沉澱濁度 | mg/mL 級 | 受顆粒影響大 |
考生易誤選 A（280 nm），因為實驗室常用且操作簡便，但「常用」不等於「靈敏」。280 nm 屬於非破壞性快測，靈敏度其實落在 mg/mL 等級，遠不及 Lowry 等顯色法。 
