專技高考-醫事檢驗師臨床生理學與病理學105 年第 47 題單選題考點:Bisulfite 原理考點:嘌呤不受影響
用聚合酶鏈反應偵測DNA的甲基化,DNA需要經過 bisulfite 前處理,產生下列何種改變?
ACytosine → Uracil正確答案
BAdenine → Cytosine
CThymine → Guanine
DGuanine → Cytosine
A正確答案
Bisulfite 處理會將「未甲基化」的 Cytosine 轉成 Uracil,而甲基化的 5mC 不變,藉此區分甲基化狀態。
逐選項解析
ACytosine → UracilBisulfite 原理✓ 正確
Bisulfite (亞硫酸氫鹽) 會使未甲基化的 Cytosine 經去氨基反應轉為 Uracil;而 5-methylcytosine (甲基化的 C) 因甲基保護不會被轉化,PCR 後 U 被讀為 T,藉此判讀甲基化位點。
BAdenine → Cytosine嘌呤不受影響✕ 錯誤
Adenine 不參與 bisulfite 反應。Bisulfite 專一作用在 pyrimidine (尤其是 C),不會動到 purine 鹼基。
DGuanine → Cytosine✕ 易錯陷阱
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