專技高考-醫事檢驗師生物化學與臨床生化學106 年第 41 題單選題
下列有關fluorometry的敘述，何者錯誤？
A可以用來檢測藥物濃度
B激發光波長比放射光波長短
C光源和偵測器是在同一直線上正確答案
D流式細胞計數儀是應用此技術的儀器
C正確答案
螢光測定法中，激發光與放射光偵測器呈 90 度直角配置，避免激發光干擾偵測。
為什麼答案是 C
錯誤！螢光分光光度計的偵測器與光源呈 90 度直角配置，目的是避免強烈的激發光直接射入偵測器造成干擾，只偵測樣品向側面放射的螢光。同直線配置是吸光光度計的設計。
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完整詳解
Pro · 無限重點 螢光測定法中，激發光與放射光偵測器呈 90 度直角配置，避免激發光干擾偵測。
看到「光源與偵測器同一直線」直接刪除，螢光儀必為 90 度設計避免激發光直接打入偵測器。
逐選項分析
A✕
螢光法靈敏度高（比吸光法高 100-1000 倍），常用於微量藥物濃度檢測（TDM），如 quinidine、奎寧類藥物等，敘述正確。
B✕
Stokes shift 原理：分子吸收激發光後部分能量以熱形式散失，故放射光能量較低、波長較長。激發光波長 < 放射光波長為螢光基本特性，敘述正確。
C✓ 正確
錯誤！螢光分光光度計的偵測器與光源呈 90 度直角配置，目的是避免強烈的激發光直接射入偵測器造成干擾，只偵測樣品向側面放射的螢光。同直線配置是吸光光度計的設計。
D✕
流式細胞儀（flow cytometry）利用螢光標記抗體偵測細胞表面標記，正是螢光技術的代表性應用儀器，廣泛用於免疫分型與細胞分析，敘述正確。
吸光光度法 vs 螢光光度法 光路設計
| 項目 | 吸光光度法 (Spectrophotometry) | 螢光光度法 (Fluorometry) |
|---|
| 光路角度 | 光源與偵測器同一直線 (180°) | 光源與偵測器呈 90° 直角 |
| 偵測原理 | 光被樣品吸收後的衰減量 | 樣品放射的螢光強度 |
| 波長關係 | 入射光 = 偵測光 | 激發光波長 < 放射光波長 |
| 靈敏度 | 較低 | 較高 (約 100-1000 倍) |
| 設計理由 | 測定穿透光減少量 | 避免激發光直射干擾偵測 |
C 選項把吸光光度計的「同直線」光路設計，移花接木到螢光光度計上。記憶口訣：螢光看「側邊」放射光，所以偵測器必在 90° 側面，不可能與光源同直線，否則強烈激發光會直接打進偵測器毀掉訊號。 
