專技高考-醫事檢驗師生物化學與臨床生化學112 年第 35 題單選題
用葡萄糖氧化酶(glucose oxidase)法測定血中葡萄糖,常加入下列何者來偵測所產生的過氧化氫的量?
ABenedict's reagent
Bo-Dianisidine正確答案
C直接測 340 nm 的吸光度變化
Dsodium nitroprusside
B正確答案
葡萄糖氧化酶法第二步用過氧化酶將H₂O₂與色素原(o-Dianisidine)反應顯色,藉此定量葡萄糖。
為什麼答案是 B
葡萄糖氧化酶將葡萄糖氧化成葡萄糖酸並產生H₂O₂,再由過氧化酶催化H₂O₂與色素原o-Dianisidine反應呈色,吸光度與葡萄糖濃度成正比,為經典偶聯顯色法。
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完整詳解
Pro · 無限重點 葡萄糖氧化酶法第二步用過氧化酶將H₂O₂與色素原(o-Dianisidine)反應顯色,藉此定量葡萄糖。
看到「偵測過氧化氫」就找需要過氧化酶催化的顯色受質→o-Dianisidine。
逐選項分析
A✕ 陷阱
Benedict's reagent(鹼性銅試劑)是傳統非酵素法測還原糖,靠葡萄糖還原Cu²⁺變磚紅色沉澱,與H₂O₂偵測無關,是舊式糖尿定性,特異性低。
B✓ 正確
葡萄糖氧化酶將葡萄糖氧化成葡萄糖酸並產生H₂O₂,再由過氧化酶催化H₂O₂與色素原o-Dianisidine反應呈色,吸光度與葡萄糖濃度成正比,為經典偶聯顯色法。
C✕ 陷阱
340 nm吸光度變化是測NAD(P)H生成/消耗的方法,常用於己糖激酶法或葡萄糖去氫酶法,並非葡萄糖氧化酶法的H₂O₂偵測原理,屬概念混淆。
D✕
Sodium nitroprusside(硝普鈉)用於檢測酮體(如尿液acetoacetate/acetone的Rothera test),與葡萄糖氧化酶法的過氧化氫偵測無關。
血糖測定法比較
| 方法 | 酵素/試劑 | 偵測物 | 波長/呈色 |
|---|
| 葡萄糖氧化酶法 | GOD + 過氧化酶 + o-Dianisidine | H₂O₂顯色 | 顯色吸光度 |
| 己糖激酶法 | HK + G6PD | NADPH生成 | 340 nm |
| Benedict法 | 鹼性銅試劑 | 還原糖 | 磚紅色沉澱 |
選項C「340 nm吸光度」是己糖激酶法/葡萄糖去氫酶法的偵測原理(NAD(P)H),與葡萄糖氧化酶法毫無關係。考生易把不同血糖測定法的偵測波長與試劑張冠李戴,務必記清各法的最終偵測物。