專技高考-醫事檢驗師生物化學與臨床生化學105 年第 29 題單選題
下列何種免疫分析法屬於異質性分析(heterogeneous assay)?
ACEDIA(cloned enzyme donor immunoassay)
BELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)正確答案
CEMIT(enzyme-multiplied immunoassay technique)
DPFIA(polarization fluoroimmunoassay)
B正確答案
異質性免疫分析需「分離」結合與未結合抗原(洗滌步驟),ELISA 是經典代表;其餘三者皆為均質性,不需分離。
為什麼答案是 B
ELISA 將抗體固定於微孔盤上,加入檢體後必須「洗去」未結合的物質,再加酵素標記抗體呈色,因為需要分離結合與未結合抗原,屬典型異質性免疫分析。
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完整詳解
Pro · 無限重點 異質性免疫分析需「分離」結合與未結合抗原(洗滌步驟),ELISA 是經典代表;其餘三者皆為均質性,不需分離。
看「需不需要洗滌分離」:ELISA 要洗板→異質性;EMIT/CEDIA/PFIA 加完試劑直接測→均質性。
逐選項分析
A✕
CEDIA 利用 β-半乳糖苷酶分裂為 donor/acceptor 兩段,抗體結合後酵素無法重組,活性變化直接反應在反應液中,不需分離 B/F,屬均質性分析。
B✓ 正確
ELISA 將抗體固定於微孔盤上,加入檢體後必須「洗去」未結合的物質,再加酵素標記抗體呈色,因為需要分離結合與未結合抗原,屬典型異質性免疫分析。
C✕ 陷阱
EMIT 以酵素標記抗原,抗體結合後酵素活性被抑制,可直接測酵素活性變化判讀,無需分離游離與結合態,屬均質性。常與 ELISA 名字相近被誤選。
D✕
PFIA(螢光偏振免疫分析)利用小分子標記抗原與抗體結合後分子轉動變慢、偏振增強,直接量測偏振度即可,不需分離步驟,屬均質性分析。
免疫分析法分類速記
| 分析法 | 原理 | 需否分離 B/F | 類型 |
|---|
| ELISA | 固相抗體+酵素呈色 | 需洗滌 | 異質性 |
| RIA | 放射標記+沉澱分離 | 需分離 | 異質性 |
| EMIT | 酵素標記抗原,結合後活性受抑 | 不需 | 均質性 |
| CEDIA | 酵素片段互補 | 不需 | 均質性 |
| PFIA | 螢光偏振變化 | 不需 | 均質性 |
免疫分析法的核心分水嶺在於「需不需要洗滌分離」。ELISA 屬於異質性分析,必須用洗滌步驟把未結合的標記物沖掉,才能準確測訊號;而 EMIT(酵素互補)、CEDIA(酵素互補)、FPIA(螢光偏振)這三種均質性分析,反應都在液相中完成,抗原結合後直接改變酵素活性或螢光性質,無需分離。出題者最愛混淆「同樣用酵素標記的 ELISA 跟 EMIT」,關鍵判斷是:看到「需分離/洗滌/固相吸附」就選異質性,看到「液相反應/無需分離/直接測活性變化」就選均質性。