專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學）107 年第 47 題單選題
有關D1/D2區定序法在真菌之鑑定，下列何者敘述正確？
AD1/D2區是位在18S-28S rRNA之 internal transcribed spacer
B具有鑑定菌種的特異性正確答案
C具有1500 bp高度變異區
D尚無商品化套組上市
B正確答案
真菌分子鑑定常用的標的為 28S rRNA 的 D1/D2 區（約 600 bp）與 ITS 區，D1/D2 區具高度種特異性，且市面早有商品化套組。
為什麼答案是 B
D1/D2 區的序列在不同真菌物種間具有高度變異性，因此具備良好的種特異性（species-specific），是臨床真菌鑑定的黃金標準之一。
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完整詳解
Pro · 無限重點 真菌分子鑑定常用的標的為 28S rRNA 的 D1/D2 區（約 600 bp）與 ITS 區，D1/D2 區具高度種特異性，且市面早有商品化套組。
看到 D1/D2 就要想到真菌 28S rRNA (約600bp)，具鑑定特異性；看到 1500 bp 則是細菌的 16S rRNA，不要混淆。
逐選項分析
A✕ 陷阱
D1/D2 區是位於 28S rRNA (Large Subunit, LSU) 基因內部的變異區；而 ITS (Internal Transcribed Spacer) 則是位於 18S、5.8S 與 28S rRNA 基因之間的轉錄間隔區，兩者是不同的分子標的。
B✓ 正確
D1/D2 區的序列在不同真菌物種間具有高度變異性，因此具備良好的種特異性（species-specific），是臨床真菌鑑定的黃金標準之一。
C✕ 陷阱
真菌 D1/D2 區的長度大約為 600 bp。選項提到的 1500 bp 通常是指細菌的 16S rRNA 基因全長，這是國考常考的數字陷阱。
D✕
針對真菌 D1/D2 區定序，市面上早已有成熟的商品化套組（例如 MicroSeq D2 rDNA Fungal Identification Kit）可供臨床與實驗室自動化使用。
微生物分子鑑定標的比較
| 微生物類別 | 主要鑑定標的 | 片段長度 | 特性與應用 |
|---|
| 細菌 | 16S rRNA | 約 1500 bp | 包含9個變異區(V1-V9)，為細菌鑑定黃金標準 |
| 真菌 | 28S rRNA (D1/D2區) | 約 600 bp | 位於LSU，常用於酵母菌與黴菌的種層級鑑定 |
| 真菌 | ITS (ITS1, ITS2) | 約 500-700 bp | 位於rRNA基因間，變異度極高，為真菌DNA條碼首選 |
考選部非常喜歡把細菌的 16S rRNA (1500 bp) 和真菌的 28S rRNA D1/D2 區 (600 bp) 混在一起考。只要看到 1500 bp，請直覺聯想「細菌」；看到 D1/D2 或 ITS，請聯想「真菌」。
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