專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學）107 年第 69 題單選題
下列何種實驗條件最能增加特異性寡核苷酸試紙（Sequence-specific oligonucleotide strip）應用於HLA分型法的鑑別度（Resolution）？
A增加此試驗方法使用的探針（Probe）數目正確答案
B增加此試驗方法使用的引子（Primer）數目
C降低反應緩衝液所含的鹽類濃度
D增加反應時的孵育溫度
A正確答案
SSO試紙法靠探針雜交辨別HLA等位基因，探針數目越多、覆蓋多型性位點越全，鑑別度越高。
為什麼答案是 A
SSO（Sequence-specific oligonucleotide）法是利用一系列序列特異性探針與目標DNA雜交，每個探針對應不同多型性位點。探針數目越多，能涵蓋的等位基因差異越完整，分型解析度（resolution）就越高，故為正解。
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完整詳解
Pro · 無限重點 SSO試紙法靠探針雜交辨別HLA等位基因，探針數目越多、覆蓋多型性位點越全，鑑別度越高。
SSO的核心是Probe（探針），題目問鑑別度→直接選增加探針數目。
逐選項分析
A✓ 正確
SSO（Sequence-specific oligonucleotide）法是利用一系列序列特異性探針與目標DNA雜交，每個探針對應不同多型性位點。探針數目越多，能涵蓋的等位基因差異越完整，分型解析度（resolution）就越高，故為正解。
B✕ 陷阱
引子（Primer）是用於PCR擴增目標HLA片段，決定能否擴增出產物，與雜交辨別的鑑別度無直接關係。增加引子數可能擴大擴增範圍，但不是提升SSO分型解析度的關鍵，屬於名詞混淆陷阱。
C✕
降低鹽類濃度會降低雜交的嚴謹度（stringency），使非專一性結合增加，反而降低辨別能力。要提升專一性應提高嚴謹度，故此選項方向錯誤。
D✕
提高孵育溫度雖能增加雜交嚴謹度，但會影響反應條件而非根本提升鑑別度，且過高溫度可能破壞雜交。鑑別度主要由探針的種類與數目決定，而非單純溫度調整。
HLA分型常見分子方法比較
| 方法 | 核心元件 | 解析度關鍵 | 特性 |
|---|
| SSO (序列特異寡核苷酸) | 探針 Probe | 探針數目越多越高 | 雜交辨別多型性 |
| SSP (序列特異引子) | 引子 Primer | 引子組合越多越高 | PCR有無產物判讀 |
| SBT (定序分型) | 定序反應 | 直接定序最高 | 最高解析度 |
B選項把「引子(Primer)」與「探針(Probe)」偷換。SSO法的關鍵元件是探針，負責雜交辨別等位基因；引子則屬於SSP法或PCR擴增階段。考生若沒分清兩者角色，很容易誤選B。
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