專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)107 年第 79 題單選題
關於雜交捕獲技術(hybrid capture technology)檢測高危險型人類乳突病毒(Human Papillomavirus, HPV)感染的操作步驟順序,何者正確?①RNA/DNA雜交體被微孔板上的雜交體特異抗體捕獲 ②RNA/DNA雜交體與結合鹼性磷酸酯酶之游離型雜交體特異抗體反應 ③鹼性磷酸酯酶水解化學發光受質 ④HPV DNA與特異性RNA探針雜交 ⑤測量相對發光值
A④①②③⑤正確答案
B①②③⑤④
C④③①②⑤
D①③④⑤②
A正確答案
雜交捕獲法順序:先DNA與RNA探針雜交→抗體捕獲→酵素抗體結合→水解發光受質→測發光值。
為什麼答案是 A
④①②③⑤完全符合雜交捕獲技術流程:HPV DNA先與特異RNA探針形成RNA/DNA雜交體→被微孔板上抗體捕獲固定→與結合鹼性磷酸酯酶的游離抗體反應→酵素水解化學發光受質→測量相對發光值(RLU),順序正確。
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完整詳解
Pro · 無限重點 雜交捕獲法順序:先DNA與RNA探針雜交→抗體捕獲→酵素抗體結合→水解發光受質→測發光值。
邏輯記憶:先「雜交」(④) →「捕獲」(①) →「標記酵素」(②) →「發光反應」(③) →「測量」(⑤)。
逐選項分析
A✓ 正確
④①②③⑤完全符合雜交捕獲技術流程:HPV DNA先與特異RNA探針形成RNA/DNA雜交體→被微孔板上抗體捕獲固定→與結合鹼性磷酸酯酶的游離抗體反應→酵素水解化學發光受質→測量相對發光值(RLU),順序正確。
B✕ 陷阱
把①(捕獲)放最前面是錯的,必須先有雜交體形成(④)才能被捕獲。且③水解發光受質放在測量(⑤)前、④雜交放最後完全違反邏輯,無法成立。
C✕
④③①②⑤把鹼性磷酸酯酶水解受質(③)排在捕獲(①)和酵素抗體結合(②)之前,但酵素尚未引入怎能水解?順序明顯錯誤。
D✕
①③④⑤②把雜交(④)排在捕獲(①)之後,邏輯顛倒;測量(⑤)放在酵素抗體結合(②)之前也不合理,整體流程錯亂。
雜交捕獲技術(HC2)標準步驟
| 順序 | 步驟 | 原理 |
|---|
| ④ | HPV DNA與特異RNA探針雜交 | 形成RNA/DNA雜交體 |
| ① | 抗體捕獲雜交體 | 微孔板上特異抗體固定雜交體 |
| ② | 結合鹼性磷酸酯酶之抗體反應 | 標記訊號酵素 |
| ③ | 酵素水解化學發光受質 | 產生發光訊號 |
| ⑤ | 測量相對發光值(RLU) | 判讀陽性/陰性 |
本題陷阱在打亂步驟順序。關鍵抓住兩個邏輯點:(1)必須先有雜交體(④)才能被捕獲(①);(2)必須先引入酵素標記抗體(②)才能水解發光受質(③)並測量(⑤)。只要任一步驟時序顛倒即為錯誤選項。
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