專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學（包括寄生蟲學）107 年第 59 題單選題
下列何者是細菌流行病學中，最廣泛且可信的分子分型法？
ASpoligotyping
BPulsed field gel electrophoresis（PFGE）正確答案
CRandom amplification of polymorphic DNA（RAPD）
DMultilocus sequence typing（MLST）
B正確答案
PFGE（脈衝場凝膠電泳）因高鑑別力與再現性佳，長期被視為細菌分子分型的「黃金標準」。
為什麼答案是 B
PFGE 利用稀有切點限制酶切割整個染色體 DNA，再以脈衝電場分離大片段，鑑別力高、再現性佳，長期被 CDC 等機構視為細菌分子分型的黃金標準，應用最廣泛且最可信。
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完整詳解
Pro · 無限重點 PFGE（脈衝場凝膠電泳）因高鑑別力與再現性佳，長期被視為細菌分子分型的「黃金標準」。
看到「最廣泛、可信、黃金標準」分子分型法→直接選 PFGE。
逐選項分析
A✕
Spoligotyping 是針對結核分枝桿菌（M. tuberculosis）的特定分型法，利用 DR 區的 spacer 序列差異，應用範圍侷限於分枝桿菌，並非通用且最廣泛的方法。
B✓ 正確
PFGE 利用稀有切點限制酶切割整個染色體 DNA，再以脈衝電場分離大片段，鑑別力高、再現性佳，長期被 CDC 等機構視為細菌分子分型的黃金標準，應用最廣泛且最可信。
C✕ 陷阱
RAPD 使用隨機引子做 PCR 產生指紋圖譜，操作快速簡便，但再現性差、實驗室間結果難以標準化比對，因此可信度低，不適合作為廣泛流行病學標準分型法。
D✕ 陷阱
MLST 以多個管家基因定序比對，標準化程度高、利於資料庫共享，是現代重要分型法，但在本題年代與題意「最廣泛且可信」的傳統標準仍以 PFGE 為主流答案。
常見細菌分子分型法比較
| 方法 | 原理 | 鑑別力/再現性 | 特點 |
|---|
| PFGE | 限制酶切割+脈衝場電泳 | 高/高 | 黃金標準、應用最廣 |
| MLST | 多管家基因定序 | 中高/高 | 標準化、可建資料庫 |
| RAPD | 隨機引子PCR | 中/低 | 快速但再現性差 |
| Spoligotyping | DR區spacer分析 | 中/高 | 結核菌專用 |
RAPD 操作最快、MLST 標準化最佳，易被誤選為「最可信」。但題目強調「最廣泛且可信」，傳統流行病學公認黃金標準為 PFGE：鑑別力與再現性兼具，故選 B。
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