專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)109 年第 55 題單選題
下列何者不是用於HLA分型之特異性寡核苷酸探針(Sequence-specific oligonucleotide probe)的特性?
A長度約19~20 bases
BRNA探針正確答案
C單股寡核苷酸
D通常有標定(Label)物質
B正確答案
HLA分型使用的SSOP探針為人工合成的「單股DNA」,長度約19-20個鹼基,並帶有標定物以利偵測,而非RNA探針。
為什麼答案是 B
本題為反向題。SSOP使用的是人工合成的「單股DNA」探針,而非RNA探針。RNA容易被環境中的RNase降解,穩定性差,不適合作為常規HLA分型的探針。
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完整詳解
Pro · 無限重點 HLA分型使用的SSOP探針為人工合成的「單股DNA」,長度約19-20個鹼基,並帶有標定物以利偵測,而非RNA探針。
看到「寡核苷酸探針(Oligonucleotide probe)」,直覺聯想人工合成的短片段「單股DNA」,RNA極易降解,不適合常規SSOP。
逐選項分析
A✕
SSOP探針長度通常設計在15~30個鹼基(bases)之間,19~20 bases是最佳長度,能確保足夠的專一性並維持適當的熔解溫度(Tm)。
B✓ 正確
本題為反向題。SSOP使用的是人工合成的「單股DNA」探針,而非RNA探針。RNA容易被環境中的RNase降解,穩定性差,不適合作為常規HLA分型的探針。
C✕
探針必須是「單股」寡核苷酸,這樣才能與經過PCR擴增並變性成單股的目標DNA序列進行互補雜交(Hybridization)。
D✕
為了在雜交反應後能夠偵測到結果,探針通常會在5'或3'端標定(Label)螢光物質、酵素或生物素(Biotin)等訊號分子。
SSOP (序列特異性寡核苷酸探針) 核心特性
| 特性 | 內容 | 目的/原因 |
|---|
| 材質 | 單股 DNA (ssDNA) | 穩定性高,不易被降解,易於人工合成 |
| 長度 | 約 15~30 bases (常見19-20) | 確保序列專一性,並具備合適的熔解溫度(Tm) |
| 結構 | 單股 (Single-stranded) | 必須為單股才能與目標DNA進行互補雜交 |
| 標定 | 螢光、酵素、Biotin等 | 雜交後可透過呈色或螢光儀器進行訊號偵測 |
考生可能知道探針是用來雜交的,但忽略了常規檢驗中為了「穩定性」與「操作便利性」,寡核苷酸探針(Oligo probe)幾乎都是人工合成的單股DNA,而非RNA。
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