專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)109 年第 67 題單選題
關於使用分子信標(molecular beacon)檢測轉錄介導核酸擴增(transcription-mediated amplification)產物的敘述,下列何者錯誤?
A具有擴增子特異性核苷酸的探針
B需要固相支持和洗滌程序產生螢光訊號正確答案
C探針的兩端分別標記螢光報告基團(reporter dye)和遮蔽基團(quencher dye)
D在恆溫下進行核酸擴增
B正確答案
分子信標是均相溶液偵測技術,不需固相支持與洗滌步驟即可即時產生螢光,B 為錯誤敘述。
為什麼答案是 B
分子信標屬於均相(homogeneous)即時偵測系統,當探針與目標雜交時莖環打開、報告基團與遮蔽基團分離即發光,完全不需固相支持與洗滌程序,此敘述錯誤,為本題答案。
載入中…
完整詳解
Pro · 無限重點 分子信標是均相溶液偵測技術,不需固相支持與洗滌步驟即可即時產生螢光,B 為錯誤敘述。
看到「需要固相支持和洗滌」就要警覺,分子信標最大優勢正是「均相、免洗滌」。
逐選項分析
A✕
分子信標探針中段序列與目標擴增子互補,具有序列特異性,可專一辨識 TMA 產生的擴增子,敘述正確。
B✓ 正確
分子信標屬於均相(homogeneous)即時偵測系統,當探針與目標雜交時莖環打開、報告基團與遮蔽基團分離即發光,完全不需固相支持與洗滌程序,此敘述錯誤,為本題答案。
C✕
分子信標呈髮夾(莖環)結構,兩端分別標記報告螢光基團與遮蔽基團,未結合目標時兩者靠近發生淬滅,敘述正確。
D✕
TMA(轉錄介導擴增)利用 reverse transcriptase 與 RNA polymerase 在約 41-42°C 恆溫下進行擴增,不需熱循環,敘述正確。
TMA 與分子信標核心特性
| 項目 | 特性 | 是否需熱循環 | 是否需洗滌 |
|---|
| TMA 擴增 | RT + RNA pol 恆溫擴增 | 否(恆溫) | 否 |
| 分子信標偵測 | 莖環探針均相螢光 | 否 | 否(免洗滌) |
| 傳統雜交+洗滌 | 固相捕捉再洗去未結合 | — | 是 |
B 選項把分子信標「均相、免洗滌」的最大優勢,顛倒敘述成「需要固相支持和洗滌」。命題者刻意將傳統固相雜交的特性硬塞到分子信標上,考驗考生是否真正理解其反應原理。
醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學) 相關題目