專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)109 年第 63 題單選題
下列何種病毒/感染症狀/檢體的組合,最不適合用於以PCR為基礎的分子診斷方法?
A腺病毒/出血性膀胱炎/尿液
B冠狀病毒/肺炎/鼻咽拭子
C巨大細胞病毒/腦炎/肝素血漿正確答案
D腸病毒/腦膜腦炎/腦脊液
C正確答案
PCR分子診斷中,肝素(Heparin)是強力PCR抑制劑,巨大細胞病毒腦炎應採EDTA血漿或CSF,而非肝素血漿,故C最不適合。
為什麼答案是 C
CMV腦炎診斷應選用EDTA抗凝血漿或腦脊液(CSF),而非肝素血漿。肝素(heparin)是強效PCR抑制劑,會競爭性抑制Taq DNA polymerase,導致PCR擴增失敗或假陰性。這是PCR前處理的經典地雷,臨床實驗室明確禁止用肝素管做PCR。
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完整詳解
Pro · 無限重點 PCR分子診斷中,肝素(Heparin)是強力PCR抑制劑,巨大細胞病毒腦炎應採EDTA血漿或CSF,而非肝素血漿,故C最不適合。
看到「肝素血漿」就要警覺!肝素是已知最強的PCR抑制劑之一,會直接抑制DNA polymerase活性,導致PCR失敗。
逐選項分析
A✕
腺病毒引起出血性膀胱炎,尿液為合適檢體。腺病毒可在尿液中大量排出,尿液PCR偵測腺病毒敏感性高且臨床實用性佳,尿液中無已知強力PCR抑制劑(適當離心處理後),此組合合適。
B✕
冠狀病毒(如SARS-CoV-2)引起肺炎,鼻咽拭子是標準且最推薦的採樣檢體。呼吸道病毒在上呼吸道複製旺盛,鼻咽拭子PCR為全球公認的黃金標準診斷方式,此組合非常適合。
C✓ 正確
CMV腦炎診斷應選用EDTA抗凝血漿或腦脊液(CSF),而非肝素血漿。肝素(heparin)是強效PCR抑制劑,會競爭性抑制Taq DNA polymerase,導致PCR擴增失敗或假陰性。這是PCR前處理的經典地雷,臨床實驗室明確禁止用肝素管做PCR。
D✕
腸病毒(如EV71、EV-D68)引起腦膜腦炎時,腦脊液(CSF)是首選分子診斷檢體。CSF中病毒核酸可直接偵測,且CSF基質干擾少,PCR敏感性及特異性均良好,此組合為臨床標準做法。
常見PCR抑制劑一覽
| 抑制劑 | 來源 | 抑制機制 | 替代抗凝劑 |
|---|
| 肝素(Heparin) | 肝素抗凝管(綠頭管) | 直接抑制DNA polymerase | EDTA(紫頭管) |
| 血紅素 | 溶血血液 | 螯合Mg²⁺、抑制酵素 | 避免溶血採檢 |
| 膽汁鹽 | 糞便檢體 | 蛋白質變性 | 稀釋或純化核酸 |
| 甲醛 | 福馬林固定組織 | 核酸交聯斷裂 | 特殊FFPE萃取試劑 |
題目問「最不適合」,考生容易被CMV腦炎的診斷邏輯帶走(CMV確實會引起腦炎),而忽略問題核心是「檢體類型」的適合性。肝素血漿是PCR的禁忌檢體,與疾病本身是否合理無關。考選部最愛用這種「疾病對但檢體錯」的組合來設陷阱!
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