專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)110 年第 62 題單選題考點:膠濃度錯誤考點:電場交替變換
為何脈衝式電泳分型法(PFGE)可有效區分大分子量的DNA片段?
A使用高濃度(>3%)的洋菜膠
B適當地變換電場方向正確答案
C限制酶剪切成小片段
D細菌DNA以洋菜膠包埋用以縮小孔徑
B正確答案
PFGE靠週期性切換電場方向,讓大分子DNA重新調整方向才能在膠中移動,達到分離效果。
逐選項解析
A使用高濃度(>3%)的洋菜膠膠濃度錯誤✕ 易錯陷阱
PFGE分離的是極大片段DNA,反而需使用低濃度(約1%)洋菜膠,使孔徑足夠大。高濃度膠孔太小,大分子無法移動,方向錯誤。
B適當地變換電場方向電場交替變換✓ 正確
PFGE的精髓在於週期性改變電場方向,每次切換時大分子DNA需重新調整方向(reorientation)才能繼續前進,不同大小片段所需重整時間不同,故能有效分離大分子量DNA。
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