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專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)11074單選題

DNA桑格定序法(Sanger sequencing)結果分別呈現如下列四選項,何者最可能是核苷酸插入(insertion)或刪去(deletion)突變所造成?

題目附圖
A圖A
B圖B
C圖C
D圖D正確答案
答案與詳解
D
正確答案
Sanger定序中insertion/deletion突變會造成移碼,使突變點後所有位置出現多色峰重疊,無法辨識鹼基,序列全變成NNNN。

為什麼答案是 D

圖D序列為ACTCGCN C N N T N N N N C N N N N N N,從第7個位置(第一個N)開始,後續幾乎全部變成N,且波形中每個位置均同時出現多條彩色峰(紅/藍/綠/黑)且高度相近、互相重疊,無法判定主要鹼基。這是因為indel(插入/刪去)造成移碼後,PCR擴增產物中兩條互補鏈在突變點後發生讀框偏移,定序儀同時接收兩組互相錯位的訊號,形成characteristic的『雙峰疊加混亂』,從突變點後全面呈現多色重疊N的模式。

考點:SNP雜合子訊號考點:定序末端品質衰減考點:正常高品質定序考點:Indel移碼雙峰疊加
載入中…

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