專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)110 年第 71 題單選題
以免疫組織化學染色法(IHC)進行致癌基因過量表現(overexpression)檢測,下列何種樣本最適合用於此檢測?
A癌組織石蠟包埋之切片正確答案
B癌組織抽取之核酸
C癌組織抽取之蛋白質
D癌症病人周邊血分離之血漿
A正確答案
IHC(免疫組織化學染色)是在組織切片上原位偵測蛋白質表現,故需用石蠟包埋切片。
為什麼答案是 A
IHC是在保留組織結構的切片上,利用抗體偵測目標蛋白並原位顯色,可觀察過量表現的細胞位置與分佈。福馬林固定石蠟包埋(FFPE)切片正是標準樣本。
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完整詳解
Pro · 無限重點 IHC(免疫組織化學染色)是在組織切片上原位偵測蛋白質表現,故需用石蠟包埋切片。
IHC=免疫『組織化學』,關鍵在『組織』!需要保留組織型態的切片才能染色定位。
逐選項分析
A✓ 正確
IHC是在保留組織結構的切片上,利用抗體偵測目標蛋白並原位顯色,可觀察過量表現的細胞位置與分佈。福馬林固定石蠟包埋(FFPE)切片正是標準樣本。
B✕ 陷阱
抽取的核酸(DNA/RNA)已脫離組織結構,適用於PCR、定序等核酸層次檢測;FISH/ISH需在切片上保留核酸原位,不適用抽取核酸。抽取樣本無法進行需保留組織型態的IHC蛋白質染色。
C✕ 陷阱
抽取的蛋白質雖能測表現量,但已破壞組織結構,適用於Western blot、ELISA,無法定位到原本細胞位置,不符IHC的原位偵測原理。
D✕
周邊血血漿屬液態樣本,無組織切片可染色,且致癌基因過量表現是針對腫瘤組織細胞,血漿不適用於IHC組織染色。
致癌基因檢測方法對應樣本
| 檢測層次 | 代表方法 | 適用樣本 | 可否定位 |
|---|
| 蛋白質(原位) | IHC | FFPE切片 | 可 |
| 蛋白質(萃取) | Western/ELISA | 抽取蛋白質 | 否 |
| 核酸(原位) | FISH/ISH | 切片 | 可 |
| 核酸(萃取) | PCR/NGS | 抽取核酸 | 否 |
B、C選項利用『抽取』偷換概念。IHC雖然偵測的是蛋白質,但必須在『組織切片』上原位染色,不能用抽取出的純化蛋白質或核酸。考生若只看到『蛋白質』就選C即落入陷阱。