專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)110 年第 56 題單選題
在分子檢驗實驗中,下列何種控制組可以檢測inhibitor造成PCR反應的false negative?
APositive control
BNegative control
CInternal control正確答案
DSensitivity control
C正確答案
PCR反應中,Internal Control(內部對照)與待測樣本同管反應,能直接偵測抑制劑(inhibitor)造成的假陰性,是偵測PCR抑制效應的黃金標準控制組。
為什麼答案是 C
Internal Control(內部對照組)是在同一反應管中加入已知量的額外模板(如非相關序列或競爭性模板),與待測樣本同時進行PCR。若Internal Control無法正常擴增,代表該管存在inhibitor,反應受到抑制,可確認結果為false negative而非真陰性。此為偵測inhibitor的最直接方法。
載入中…
完整詳解
Pro · 無限重點 PCR反應中,Internal Control(內部對照)與待測樣本同管反應,能直接偵測抑制劑(inhibitor)造成的假陰性,是偵測PCR抑制效應的黃金標準控制組。
關鍵字:抑制劑 + 同一管反應 + 假陰性 → 只有Internal Control與樣本共存於同一反應管中,才能感受到inhibitor的存在。
逐選項分析
A✕ 陷阱
Positive Control(陽性對照組)是使用已知陽性模板獨立進行PCR,確認試劑與反應條件是否正常運作。但它是「另一管」實驗,不含待測樣本,無法反映樣本中inhibitor的存在,故無法偵測樣本造成的假陰性。容易被誤選。
B✕
Negative Control(陰性對照組)通常以無模板水代替樣本,用途是確認試劑無污染、無非特異性擴增。它本身沒有目標序列,不涉及inhibitor的偵測,無法判斷樣本是否含有抑制劑。
C✓ 正確
Internal Control(內部對照組)是在同一反應管中加入已知量的額外模板(如非相關序列或競爭性模板),與待測樣本同時進行PCR。若Internal Control無法正常擴增,代表該管存在inhibitor,反應受到抑制,可確認結果為false negative而非真陰性。此為偵測inhibitor的最直接方法。
D✕
Sensitivity Control(靈敏度對照組)是用低濃度已知陽性樣本確認PCR偵測極限(detection limit),評估方法靈敏度是否達標。它與inhibitor是否存在於樣本中無關,不能用於偵測false negative的原因。
PCR四大控制組功能對照
| 控制組 | 內容物 | 主要功能 | 能偵測inhibitor? |
|---|
| Positive Control | 已知陽性模板(單獨管) | 確認試劑/條件正常 | ❌ 否 |
| Negative Control | 無模板(水) | 確認無污染/非特異性 | ❌ 否 |
| Internal Control | 已知模板+待測樣本(同管) | 偵測inhibitor → 排除假陰性 | ✅ 是 |
| Sensitivity Control | 低濃度已知陽性樣本 | 確認偵測極限/靈敏度 | ❌ 否 |
考生常混淆Positive Control與Internal Control,以為「陽性對照能確認陽性結果」就可以偵測假陰性。關鍵差異在於:Positive Control是「另一管」,不受樣本inhibitor影響;只有Internal Control與樣本「同管」共存,才能真實反映inhibitor對PCR反應的抑制效果。
醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學) 相關題目