專技高考-醫事檢驗師臨床血液學與血庫學111 年第 79 題單選題
有關流式細胞儀螢光補償 (color compensation)之敘述,下列何者最適當?
A可用於調校檢體自發之干擾螢光
B若螢光之吸收光譜重疊,則不需執行光補償調整
C同時使用之螢光愈多,光補償的影響愈不顯著
D使用適當的濾鏡可以降低螢光光譜重疊訊號干擾正確答案
D正確答案
螢光補償用於校正不同螢光染料之間放射光譜重疊造成的訊號干擾,使用適當濾鏡可降低重疊訊號。
為什麼答案是 D
正確。流式細胞儀利用適當的濾鏡(band-pass、long-pass 等)選擇特定波長範圍,搭配軟體補償計算,可降低不同螢光放射光譜重疊所造成的訊號干擾,是補償概念的核心做法。
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完整詳解
Pro · 無限重點 螢光補償用於校正不同螢光染料之間放射光譜重疊造成的訊號干擾,使用適當濾鏡可降低重疊訊號。
補償=處理「光譜重疊」問題。重疊愈嚴重、螢光愈多就愈需要補償,刪去法選 D。
逐選項分析
A✕ 陷阱
光補償是用來校正不同螢光染料間「放射光譜重疊(spillover)」的訊號,而非校正檢體本身的自發螢光(autofluorescence)。自發螢光通常以未染色對照或專門設定處理,兩者概念不同。
B✕ 陷阱
正好相反。當螢光放射光譜重疊時,正是「必須」執行光補償的時機,否則一個偵測器會收到另一染料外溢的訊號造成偽陽性。光譜重疊愈大,補償需求愈高。
C✕
敘述顛倒。同時使用的螢光染料愈多,彼此間放射光譜重疊機會愈大,補償的計算與影響就愈複雜、愈顯著,而非愈不顯著。多色分析時補償設定尤其關鍵。
D✓ 正確
正確。流式細胞儀利用適當的濾鏡(band-pass、long-pass 等)選擇特定波長範圍,搭配軟體補償計算,可降低不同螢光放射光譜重疊所造成的訊號干擾,是補償概念的核心做法。
流式細胞儀螢光補償核心觀念
| 項目 | 說明 |
|---|
| 補償目的 | 校正不同染料放射光譜重疊(spillover) |
| 何時需要 | 光譜重疊愈大、螢光數愈多→愈需補償 |
| 處理方式 | 適當濾鏡選波長 + 軟體補償矩陣 |
| 自發螢光 | 另以未染色對照處理,非補償功能 |
本題 B、C 皆用「顛倒邏輯」設陷阱:把「重疊才需補償」說成不需、把「多色更需補償」說成影響不顯著。A 則偷換概念,把自發螢光當成補償對象。記住補償只處理染料間光譜重疊即可破解。