專技高考-醫事檢驗師生物化學與臨床生化學108 年第 33 題單選題
下列方法中,何者最適合作特定胺基酸定量?
A薄層層析法(TLC)
BGuthrie bacterial inhibition分析法
C質譜分析法(MS)正確答案
DNinhydrin呈色法
C正確答案
質譜分析法 (MS) 具高靈敏度與專一性,可同時定性定量特定胺基酸,是新生兒篩檢與胺基酸定量首選。
為什麼答案是 C
質譜分析法(尤其是 Tandem MS, MS/MS)可依分子量與碎片離子精準鑑定特定胺基酸,並進行高靈敏度定量,現為新生兒胺基酸代謝異常篩檢的金標準。
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完整詳解
Pro · 無限重點 質譜分析法 (MS) 具高靈敏度與專一性,可同時定性定量特定胺基酸,是新生兒篩檢與胺基酸定量首選。
看到「特定」+「定量」→ 想到 MS(高專一性 + 精準定量),其他方法多為「篩檢」或「總量」。
逐選項分析
A✕
TLC 屬於「分離」與「半定量」技術,靠 Rf 值比對與斑點濃淡判讀,靈敏度與精準度不足,不適合做特定胺基酸的精確定量。
B✕ 陷阱
Guthrie 法是早期新生兒苯酮尿症 (PKU) 的「篩檢」方法,利用細菌生長抑制原理,僅能判定苯丙胺酸是否過高,屬於定性/半定量篩檢,現已被 MS 取代。
C✓ 正確
質譜分析法(尤其是 Tandem MS, MS/MS)可依分子量與碎片離子精準鑑定特定胺基酸,並進行高靈敏度定量,現為新生兒胺基酸代謝異常篩檢的金標準。
D✕ 陷阱
Ninhydrin 與所有含 α-胺基的胺基酸反應呈紫色(脯胺酸呈黃色),僅能測「總胺基酸量」,無法區分特定胺基酸,故不適合作特定胺基酸定量。
胺基酸分析方法比較
| 方法 | 用途 | 特異性 | 定量能力 |
|---|
| TLC | 分離初步鑑定 | 低 | 半定量 |
| Guthrie | PKU 篩檢 | 單一胺基酸 | 半定量 |
| MS / MS-MS | 特定胺基酸定量 | 極高 | 精準定量 ✓ |
| Ninhydrin | 總胺基酸呈色 | 無(通用) | 測總量 |
考生易把「篩檢」與「定量」混淆。Guthrie 與 Ninhydrin 雖能「偵測」胺基酸,但前者只篩單一、後者測總量,皆不符「特定胺基酸定量」。題眼在「特定」+「定量」雙條件,唯有 MS 同時滿足。