專技高考-醫事檢驗師生物化學與臨床生化學108 年第 72 題單選題
測定Total CO2時,若先將檢體鹼化後,則各種CO2成分將轉變成某單一型式產物,該產物可用下列何種方法測定?
A免疫分析法(Immunoassay)
B酵素法(Enzymatic method)正確答案
C高效能液態層析法(High performance liquid chromatography, HPLC)
D電泳法(Electrophoresis)
B正確答案
Total CO2 鹼化後全部變成 HCO3⁻,臨床實驗室用 PEPC/MDH 酵素法測定。
為什麼答案是 B
鹼化後 CO2/H2CO3/HCO3⁻ 均轉為 HCO3⁻,臨床採用 PEPC(磷酸烯醇丙酮酸羧化酶)將 HCO3⁻ 與 PEP 反應生成 OAA,再經 MDH 消耗 NADH,於 340 nm 偵測吸光度下降量,即為 Total CO2。
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完整詳解
Pro · 無限重點 Total CO2 鹼化後全部變成 HCO3⁻,臨床實驗室用 PEPC/MDH 酵素法測定。
看到「血液氣體 / HCO3⁻ / Total CO2」自動連結酵素法(PEPC + NADH 偵測 340nm)。
逐選項分析
A✕
免疫分析法用抗原-抗體結合,適合測蛋白質、荷爾蒙、藥物等大分子或具免疫原性物質。HCO3⁻ 是小無機離子,無法產生免疫反應,故不適用。
B✓ 正確
鹼化後 CO2/H2CO3/HCO3⁻ 均轉為 HCO3⁻,臨床採用 PEPC(磷酸烯醇丙酮酸羧化酶)將 HCO3⁻ 與 PEP 反應生成 OAA,再經 MDH 消耗 NADH,於 340 nm 偵測吸光度下降量,即為 Total CO2。
C✕
HPLC 用於分離混合物中各組成(如藥物、胺基酸、維生素)。Total CO2 已被統一成單一 HCO3⁻,不需分離;且小無機離子不適合一般 HPLC 偵測。
D✕
電泳法依分子大小或電荷分離大分子(蛋白質、核酸、脂蛋白),不用於小離子定量;且檢體已鹼化成單一形式,本就不需分離技術。
Total CO2 測定流程
| 步驟 | 處理 | 目的 | 偵測 |
|---|
| 1. 鹼化 | 加入鹼性試劑 | CO2/H2CO3 → HCO3⁻ 統一形式 | — |
| 2. 酵素反應1 | PEPC + PEP + HCO3⁻ | 生成 OAA | — |
| 3. 酵素反應2 | MDH + NADH | OAA → malate, NADH → NAD⁺ | 340 nm 吸光下降 |
| 4. 計算 | ΔA340 ∝ [HCO3⁻] | 推算 Total CO2 濃度 | 分光光度計 |
考生看到「鹼化處理」「單一產物」可能直覺想到 HPLC 或電泳「分離」,但鹼化目的反而是「不分離」、把所有 CO2 形式統一後直接定量。關鍵字是「定量」而非「分離」,故選酵素法。