專技高考-醫事檢驗師醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學(包括寄生蟲學)106 年第 57 題單選題
有關multi-locus sequence typing(MLST)細菌基因分型方法,下列敘述何者錯誤?
AMLST較16S rRNA序列分析更具分型能力
BMLST分析的基因是以家管基因(Housekeeping gene)為主
CMLST是以allelic profile的sequence type編碼分型
DMLST適用於檢體中未知細菌的分型正確答案
D正確答案
MLST 是針對「已分離培養出的純菌株」做基因分型,無法直接從複雜檢體中辨識未知細菌。
為什麼答案是 D
錯誤敘述(即本題答案)。MLST 必須先有「已知種別的純菌株」才能設計專一性引子定序家管基因。檢體中未知細菌應先用 16S rRNA 或培養鑑定到種,才可進一步 MLST 分型。
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完整詳解
Pro · 無限重點 MLST 是針對「已分離培養出的純菌株」做基因分型,無法直接從複雜檢體中辨識未知細菌。
看到「未知細菌」「直接從檢體」就刪 → MLST 需要純菌做 PCR 定序,不是鑑定工具而是分型工具。
逐選項分析
A✕
正確敘述。16S rRNA 高度保守,分到「種」層級就停了;MLST 用 7 個家管基因組合,可分辨同種不同株(strain level),分型解析度遠高於 16S。
B✕
正確敘述。MLST 選用 7 個 housekeeping gene(如 gyrB、recA、rpoB 等),這類基因在細菌生存必需、演化壓力穩定、變異中性,適合作為分型基準。
C✕
正確敘述。每個家管基因定序後依序列差異給 allele number,7 個 allele 組合成 allelic profile,再對應到唯一的 sequence type(ST)編號,全球資料庫可比對。
D✓ 正確
錯誤敘述(即本題答案)。MLST 必須先有「已知種別的純菌株」才能設計專一性引子定序家管基因。檢體中未知細菌應先用 16S rRNA 或培養鑑定到種,才可進一步 MLST 分型。
16S rRNA vs MLST 比較
| 項目 | 16S rRNA 定序 | MLST |
|---|
| 分析基因 | 16S rRNA(單一保守基因) | 7 個 housekeeping gene |
| 解析層級 | 種 (species) 層級 | 株 (strain) 層級 |
| 主要用途 | 未知菌種「鑑定」 | 已知菌種「分型」與流行病學追蹤 |
| 可否用於未知檢體 | 可(廣譜引子) | 不可(需先鑑定到種) |
考生易把 MLST 與 16S rRNA 混為一談,誤以為兩者都能「直接從臨床檢體查出未知菌」。實際上 MLST 是「分型工具」不是「鑑定工具」,必須在已知種屬的純菌上操作;16S rRNA 才是廣譜鑑定首選。
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