專技高考-醫事檢驗師生物化學與臨床生化學110 年第 4 題單選題
下列何種波長適用於測定蛋白質胜肽鍵(Peptide bond)的吸光度?
A220 nm正確答案
B280 nm
C340 nm
D545 nm
A正確答案
胜肽鍵(Peptide bond)在遠紫外光區約 200-220 nm 有強吸收,故選 220 nm。
為什麼答案是 A
胜肽鍵的 C=O 與 N 之間的醯胺鍵在遠紫外區 (約 190-220 nm) 有強烈吸收,常用 205-220 nm 測定蛋白質胜肽鍵含量,是本題正解。
載入中…
完整詳解
Pro · 無限重點 胜肽鍵(Peptide bond)在遠紫外光區約 200-220 nm 有強吸收,故選 220 nm。
記口訣:胜肽鍵 220、芳香環(Trp/Tyr) 280、NADH 340。
逐選項分析
A✓ 正確
胜肽鍵的 C=O 與 N 之間的醯胺鍵在遠紫外區 (約 190-220 nm) 有強烈吸收,常用 205-220 nm 測定蛋白質胜肽鍵含量,是本題正解。
B✕ 陷阱
280 nm 是測定蛋白質的常見波長,但其吸收來自芳香族胺基酸(色胺酸 Trp、酪胺酸 Tyr)的苯環,並非胜肽鍵本身,屬經典陷阱選項。
C✕
340 nm 是 NADH / NADPH 還原態的特徵吸收波長,常用於酵素動力學與去氫酶活性測定,與胜肽鍵無關。
D✕
545 nm 屬可見光區,常見於 Biuret 法或顯色反應後測定,並非直接測胜肽鍵紫外吸收,本題不適用。
常見生化吸光波長對照
| 波長 | 吸收物質 | 用途 |
|---|
| 220 nm | 胜肽鍵 (醯胺鍵) | 測蛋白質胜肽鍵 |
| 280 nm | Trp/Tyr 芳香環 | 快速估蛋白質濃度 |
| 340 nm | NADH/NADPH | 酵素活性動力學 |
| 545 nm | 顯色複合物 | Biuret 等比色法 |
考生最易誤選 280 nm,因為它是「測蛋白質」最常用波長。但題目問的是「胜肽鍵」的吸收,胜肽鍵是醯胺鍵,吸收在 220 nm;280 nm 測的是芳香環側鏈,兩者來源不同務必分清。