專技高考-醫事檢驗師生物化學與臨床生化學105 年第 77 題單選題
使用glycerol kinase/pyruvate kinase/lactate dehydrogenase的酵素反應可以用來測定血清：
B正確答案
三酵素串聯法測甘油：GK磷酸化甘油消耗ATP→PK催化PEP產生ATP→LDH把丙酮酸還原為乳酸並氧化NADH，由NADH吸光下降量推算甘油濃度。
為什麼答案是 B
Glycerol kinase 將甘油磷酸化為 glycerol-3-P，PK 利用 PEP 再生 ATP 並產生 pyruvate，LDH 將 pyruvate 還原為 lactate 並氧化 NADH→NAD+，340 nm 吸光下降量正比於甘油量。
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完整詳解
Pro · 無限重點 三酵素串聯法測甘油：GK磷酸化甘油消耗ATP→PK催化PEP產生ATP→LDH把丙酮酸還原為乳酸並氧化NADH，由NADH吸光下降量推算甘油濃度。
看到 glycerol kinase 第一個酵素就是 glycerol 開頭→直接鎖定甘油 (B)。臨床上常用於三酸甘油酯水解後的甘油測定。
逐選項分析
A✕
磷脂測定常用 phospholipase D 水解產生 choline，再經 choline oxidase 產生 H2O2，與本題酵素組合不符。
B✓ 正確
Glycerol kinase 將甘油磷酸化為 glycerol-3-P，PK 利用 PEP 再生 ATP 並產生 pyruvate，LDH 將 pyruvate 還原為 lactate 並氧化 NADH→NAD+，340 nm 吸光下降量正比於甘油量。
C✕
游離膽固醇測定使用 cholesterol oxidase 直接氧化 cholesterol 產生 H2O2，再以 peroxidase 顯色，不涉及 glycerol kinase。
D✕ 陷阱
陷阱！總膽固醇需先用 cholesterol esterase 水解膽固醇酯，再以 cholesterol oxidase 氧化測定，與甘油酵素系統無關。考生若忽略第一個酵素 GK 易誤選。
臨床生化常見酵素法測定對照
| 待測物 | 關鍵酵素 | 偵測方式 | 波長 |
|---|
| 甘油 / TG | GK + PK + LDH | NADH 消耗 | 340 nm 下降 |
| 甘油 / TG (另法) | GK + GPO + POD | H2O2 顯色 | 500 nm 上升 |
| 游離膽固醇 | CHOD + POD | H2O2 顯色 | 500 nm |
| 總膽固醇 | CHE + CHOD + POD | H2O2 顯色 | 500 nm |
| 磷脂 | PLD + ChOD + POD | H2O2 顯色 | 500 nm |
本題關鍵在第一個酵素 glycerol kinase——名稱已直接點明受質是 glycerol。考生若被後面 PK/LDH (糖解途徑酵素) 誤導去想丙酮酸或乳酸，反而偏離主題。記住：酵素串聯法看『第一棒』酵素就是受質。 
