專技高考-醫事檢驗師生物化學與臨床生化學104 年第 48 題單選題
下列何種方法是利用糖化血紅素與非糖化血紅素結構之差異而將此兩者分離？
Acation exchange chromatography
Baffinity chromatography正確答案
Cspectrophotometery
Dfluorometry
B正確答案
糖化血紅素 (HbA1c) 帶有葡萄糖殘基，可用 boronate 親和層析特異結合，故用 affinity chromatography 分離。
為什麼答案是 B
親和層析利用 boronate (硼酸基) 與糖化血紅素上的順式二醇 (cis-diol) 結構特異結合，非糖化血紅素無此結構而被沖洗掉，正符合「結構差異」之分離原理。
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完整詳解
Pro · 無限重點 糖化血紅素 (HbA1c) 帶有葡萄糖殘基，可用 boronate 親和層析特異結合，故用 affinity chromatography 分離。
看到「結構差異」分離 → 想到 affinity（特異性結合）；若是「電荷差異」才選離子交換。
逐選項分析
A✕ 陷阱
陽離子交換層析確實是 HbA1c 常見檢測法，但它利用的是糖化與非糖化血紅素「電荷差異」（糖化後等電點降低），而非「結構差異」，與題幹敘述不符。
B✓ 正確
親和層析利用 boronate (硼酸基) 與糖化血紅素上的順式二醇 (cis-diol) 結構特異結合，非糖化血紅素無此結構而被沖洗掉，正符合「結構差異」之分離原理。
C✕
分光光度法是「定量」工具，依吸光度測濃度，無法將糖化與非糖化血紅素「分離」，且本身不利用結構差異。
D✕
螢光分析法亦屬偵測/定量技術，需配合螢光標記使用，並非利用兩種血紅素結構差異進行分離的方法。
HbA1c 常見檢測方法比較
| 方法 | 原理依據 | 差異基礎 | 可否分離 |
|---|
| 陽離子交換層析 | 糖化後等電點下降 | 電荷差異 | 可 |
| Boronate 親和層析 | 硼酸結合 cis-diol | 結構差異 | 可 |
| 免疫法 (immunoassay) | 抗體辨識糖化 N 端 | 抗原決定位 | 可 |
| 分光光度/螢光法 | 光學訊號偵測 | 無分離功能 | 否 |
A 選項陽離子交換層析確實是 HbA1c 臨床檢測主流，考生易直覺選 A。但題幹明確問「結構差異」，這是 boronate 親和層析的特徵；若題幹改為「電荷差異」則答案才是 A。看清題眼是關鍵。 
