專技高考-醫事檢驗師生物化學與臨床生化學104 年第 57 題單選題
利用蘋果酸脫氫酶（malate dehydrogenase）偶合反應偵測AST活性時，是測下列何者吸收值改變？
A2-oxoglutarate
Bmalate
CNADPH
DNADH正確答案
D正確答案
AST 活性測定採 MDH 偶合反應，最終以 NADH 在 340 nm 吸收值下降來定量。
為什麼答案是 D
AST 將 aspartate + α-KG 轉成 OAA + glutamate，OAA 再被 MDH 還原為 malate，同時消耗 NADH→NAD+。NADH 在 340 nm 有吸收，吸光值下降速率即代表 AST 活性。
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完整詳解
Pro · 無限重點 AST 活性測定採 MDH 偶合反應，最終以 NADH 在 340 nm 吸收值下降來定量。
看到酵素活性偶合反應+脫氫酶 → 幾乎都是測 NADH/NAD+ 在 340 nm 的變化。
逐選項分析
A✕
2-oxoglutarate（α-酮戊二酸）是 AST 反應的受質之一，無特徵性紫外吸收，不能作為偵測指標。
B✕
Malate 是 MDH 反應的產物，但 malate 本身在 340 nm 沒有吸收，不能直接偵測。
C✕ 陷阱
陷阱選項！NADPH 雖在 340 nm 有吸收，但 MDH 偶合反應使用的輔酶是 NADH/NAD+，不是 NADPH/NADP+，要看清輔酶種類。
D✓ 正確
AST 將 aspartate + α-KG 轉成 OAA + glutamate，OAA 再被 MDH 還原為 malate，同時消耗 NADH→NAD+。NADH 在 340 nm 有吸收，吸光值下降速率即代表 AST 活性。
AST 活性測定（MDH 偶合法）反應流程
| 步驟 | 酵素 | 反應 | 偵測 |
|---|
| 1 | AST | Asp + α-KG → OAA + Glu | 無法直接測 |
| 2 (偶合) | MDH | OAA + NADH → Malate + NAD+ | NADH 340nm ↓ |
| 結論 | — | AST 活性 ∝ NADH 消耗速率 | 吸光下降速率 |
C 選項 NADPH 是經典陷阱！雖然 NADPH 與 NADH 都在 340 nm 有吸收，但 MDH 使用的輔酶是 NADH 而非 NADPH。考生若只記「340 nm」而沒記清輔酶種類，就會誤選 C。 
