專技高考-醫事檢驗師生物化學與臨床生化學109 年第 43 題單選題
使用HPLC分析糖化血紅素( HbA1c )時,儀器所含之固相為何?
AOctadecylsilane(C18)
BCation exchange resin正確答案
CAnion exchange resin
DPolystyrene divinylbenzene
B正確答案
HbA1c 帶正電氨基較少,用陽離子交換樹脂分離糖化與非糖化血紅素,是臨床標準法。
為什麼答案是 B
HbA1c 因 β 鏈 N 端纈胺酸被葡萄糖糖化,正電荷減少、等電點降低;用陽離子交換樹脂時,HbA1c 結合力較弱會先被沖提出,可與 HbA0 分離定量。
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完整詳解
Pro · 無限重點 HbA1c 帶正電氨基較少,用陽離子交換樹脂分離糖化與非糖化血紅素,是臨床標準法。
記憶口訣:HbA1c 糖化後等電點下降→帶正電較少→用『陽離子交換樹脂(Cation exchange)』先沖出。
逐選項分析
A✕ 陷阱
C18 是逆相層析(reverse phase)的固相,依疏水性分離小分子如藥物、胺基酸代謝物,不適合分離帶電性質相近的血紅素變異體。
B✓ 正確
HbA1c 因 β 鏈 N 端纈胺酸被葡萄糖糖化,正電荷減少、等電點降低;用陽離子交換樹脂時,HbA1c 結合力較弱會先被沖提出,可與 HbA0 分離定量。
C✕ 陷阱
陰離子交換樹脂結合帶負電分子,但血紅素在分析 pH 下整體偏正電,不適用;且糖化後正電變化才是分離關鍵,須用陽離子交換。
D✕
Polystyrene divinylbenzene 為疏水性聚合物樹脂骨架,常作為固相支撐材料或用於 SPE,非 HbA1c HPLC 分析的選擇性固相。
HPLC 固相 vs 應用對照
| 固相類型 | 分離原理 | 適用對象 | HbA1c? |
|---|
| C18 (ODS) | 疏水性 (逆相) | 藥物、小分子代謝物 | ❌ |
| Cation exchange | 結合正電 | 血紅素變異體、HbA1c | ✅ |
| Anion exchange | 結合負電 | 核酸、有機酸 | ❌ |
| PS-DVB | 疏水/支撐骨架 | SPE、樹脂基材 | ❌ |
陽離子/陰離子交換樹脂常被搞反!記住命名是依『結合的離子』:陽離子交換樹脂帶負電基團、結合帶正電的分析物。HbA1c 在分析 pH 下帶正電,故用陽離子交換樹脂。